導(dǎo)讀：對(duì)于中醫(yī)和中藥而言，當(dāng)務(wù)之急不是明確療效的機(jī)制，而是發(fā)展完善中醫(yī)的臨床評(píng)價(jià)體系。

2020 年，中醫(yī)藥在治療新型冠狀病毒感染的肺炎方面發(fā)揮了至關(guān)重要的作用，也再一次讓我們看到了發(fā)展中醫(yī)藥事業(yè)的重要性。位于北京良鄉(xiāng)大學(xué)城的北京中醫(yī)藥大學(xué)是“中醫(yī)老四?！敝唬?1956 年建校以來(lái)，為我國(guó)的中醫(yī)行業(yè)人才培養(yǎng)和中醫(yī)藥研究發(fā)展做出巨大貢獻(xiàn)。近日，儀器信息網(wǎng)走進(jìn)北京中醫(yī)藥大學(xué)北京中醫(yī)藥研究院，并采訪了北京中醫(yī)藥研究院細(xì)胞分子生物學(xué)平臺(tái)儀器管理人王鐵山。

王鐵山 北京中醫(yī)藥大學(xué)北京中醫(yī)藥研究院

細(xì)胞分子生物學(xué)平臺(tái)負(fù)責(zé)人

公共實(shí)驗(yàn)平臺(tái)管理方式多為“通管通用

”

北京中醫(yī)藥研究院前身是北京中醫(yī)藥大學(xué)的校級(jí)科研平臺(tái)，設(shè)立初衷是舉全校之力為經(jīng)費(fèi)不足的老師們提供專業(yè)科研儀器，最初該平臺(tái)大部分儀器均是大型高值類設(shè)備，甚至很多設(shè)備在全校是唯一性的。后來(lái)為了讓平臺(tái)發(fā)揮更大作用，學(xué)校將其“升級(jí)”為北京中醫(yī)藥研究院。目前北京中醫(yī)藥研究院主要有兩個(gè)職能，一是仍作為校級(jí)科研服務(wù)平臺(tái)為師生提供科研測(cè)試服務(wù)，二是作為北京中醫(yī)藥大學(xué)的新藥研發(fā)高地研發(fā)和創(chuàng)制中藥新藥。

王鐵山負(fù)責(zé)的細(xì)胞分子生物學(xué)平臺(tái)是北京中醫(yī)藥研究院5大科研平臺(tái)之一，位于良鄉(xiāng)校區(qū)科研綜合樓四層，包括流式細(xì)胞室、細(xì)胞間等多個(gè)特定功能實(shí)驗(yàn)室。走進(jìn)平臺(tái)，各實(shí)驗(yàn)室均整齊有序地排列著用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的儀器。

談到儀器設(shè)備的統(tǒng)籌管理，王鐵山頗具心得。他介紹了大型實(shí)驗(yàn)平臺(tái)主要的幾種管理方式，包括專管專用，專管通用，通管通用。專管專用適用于獨(dú)立課題組實(shí)驗(yàn)室，儀器供組內(nèi)使用，通常是獨(dú)立團(tuán)隊(duì)有特別擅長(zhǎng)的領(lǐng)域，從事某一細(xì)分領(lǐng)域的研究，使用和管理其擅長(zhǎng)領(lǐng)域的相關(guān)儀器，更容易發(fā)揮出這些專業(yè)儀器的價(jià)值；專管通用是指儀器由某一課題組專人負(fù)責(zé)，共多方使用；通管通用，通常由學(xué)?；蛘邔W(xué)校成立公共實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，由隸屬于公共實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的專職管理人員進(jìn)行測(cè)試服務(wù)，服務(wù)于全?；蛘呷?，通常高值型儀器，包括高值通用和高值專用類設(shè)備，大多時(shí)候以高值通用為主。高值專用的設(shè)備主要是一些重要但相對(duì)冷門(mén)的儀器和技術(shù)，需要整個(gè)學(xué)校的需求來(lái)讓其充分運(yùn)轉(zhuǎn)，避免因長(zhǎng)期不用而造成的損壞。

對(duì)于實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的分級(jí)管理，王鐵山認(rèn)為將儀器按高值、低值、專用和通用分成四類，將平臺(tái)分成校級(jí)、院級(jí)和團(tuán)隊(duì)三級(jí)。校級(jí)平臺(tái)應(yīng)以高值通用為主，高值專用為輔，適當(dāng)購(gòu)買(mǎi)必須的低值設(shè)備。院級(jí)平臺(tái)則應(yīng)以具有學(xué)院特色的專用類設(shè)備為主，根據(jù)學(xué)院需求適當(dāng)購(gòu)買(mǎi)通用設(shè)備。這兩類平臺(tái)都更適合于專管通用或者通管通用。團(tuán)隊(duì)平臺(tái)則以自己團(tuán)隊(duì)優(yōu)勢(shì)的專用的高低值儀器為主，適當(dāng)購(gòu)買(mǎi)團(tuán)隊(duì)使用率高的通用設(shè)備。團(tuán)隊(duì)平臺(tái)都是專管專用，這樣管理方便且高效。

北京中醫(yī)藥研究院的細(xì)胞分子生物學(xué)平臺(tái)的管理方式屬于通管通用，王鐵山介紹了該平臺(tái)具體儀器使用原則：“我們這邊的儀器分成 4 類，第一類是實(shí)驗(yàn)室常規(guī)設(shè)備，經(jīng)培訓(xùn)后學(xué)生自己獨(dú)立操作使用的，會(huì)開(kāi)放晚上和周末的使用權(quán)限，負(fù)責(zé)人不在的情況下學(xué)生也可以用，出現(xiàn)問(wèn)題由儀器負(fù)責(zé)人解決，如電泳儀、全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀等；第二類儀器是有一定安全風(fēng)險(xiǎn)的設(shè)備，只有負(fù)責(zé)人在時(shí)學(xué)生可以使用，周末和晚上不開(kāi)放權(quán)限，如高壓蒸汽滅菌鍋、超速離心機(jī)等；第三類是操作難度較高，需要較長(zhǎng)時(shí)間和經(jīng)驗(yàn)的儀器設(shè)備，這類設(shè)備以助研操作為主，負(fù)責(zé)人操作為輔，基本不讓學(xué)生使用，如常規(guī)流式細(xì)胞儀，高內(nèi)涵顯微鏡等；第四類儀器設(shè)備的價(jià)值較高，操作較為復(fù)雜，主要平臺(tái)負(fù)責(zé)人使用，如流式細(xì)胞分選儀，多色流式細(xì)胞分析儀等。”

酶標(biāo)儀等多種檢測(cè)儀器的基礎(chǔ)均為光學(xué)檢測(cè)手段

與西藥研究過(guò)程相反，中藥的研究通常先進(jìn)行小動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，之后是切片組織形態(tài)、機(jī)能研究，再到細(xì)胞和分子生物學(xué)研究。王鐵山介紹道，“細(xì)胞和分子生物學(xué)技術(shù)在中藥研發(fā)中主要有兩個(gè)作用，一是從更基礎(chǔ)、更清楚的層次闡明藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用，二是在明確物質(zhì)基礎(chǔ)和作用的前提下，爭(zhēng)取獲得一類新藥，即化藥。相對(duì)于成分單一穩(wěn)定的化藥，中成藥品間控制是個(gè)很大的問(wèn)題。細(xì)胞生物學(xué)在中藥品控過(guò)程中作用是驗(yàn)明藥效，但由于成本問(wèn)題，主要用于科研過(guò)程中，很難商業(yè)化?！?

在細(xì)胞和分子生物學(xué)的研究工作中，酶標(biāo)儀、流式細(xì)胞儀、顯微成像系統(tǒng)等儀器發(fā)揮著重要作用，王鐵山按照自己的體系闡述了他對(duì)這些儀器應(yīng)用上的理解：

“其實(shí) 80% 以上儀器的基礎(chǔ)都是光學(xué)檢測(cè)手段，包括吸光、熒光和化學(xué)發(fā)光。以酶標(biāo)儀為例，按照功能分類，酶標(biāo)儀包括光吸收酶標(biāo)儀、熒光酶標(biāo)儀、化學(xué)發(fā)光酶標(biāo)儀和多功能酶標(biāo)儀等多個(gè)種類，包括了所有的光學(xué)檢測(cè)手段。

檢測(cè)前，首先要明確所需結(jié)果是分子平均值水平的，還是細(xì)胞獨(dú)立水平的。流式細(xì)胞儀和酶標(biāo)儀兩者基本原理一樣，都是以熒光為背景的，但流式細(xì)胞儀是把每一個(gè)細(xì)胞當(dāng)成單獨(dú)的個(gè)體來(lái)檢測(cè)，而酶標(biāo)儀檢測(cè)結(jié)果是孔的平均值，所有以孔為單位檢測(cè)需要樣本平均值的實(shí)驗(yàn)，都可用酶標(biāo)儀來(lái)做；分光光度計(jì)是光學(xué)檢測(cè)儀器的‘祖先’，酶標(biāo)儀和分光光度計(jì)的原理也相同，但酶標(biāo)儀可以滿足高通量的檢測(cè)需求。此外，它們還有一個(gè)‘近親’是全自動(dòng)生化分析儀，所有可用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)的樣本，用酶標(biāo)儀也都能做，只是酶標(biāo)儀需要手動(dòng)加樣制樣，而全自動(dòng)生化分析儀是自動(dòng)完成?！?

對(duì)于細(xì)胞和分子生物學(xué)中廣泛使用的酶標(biāo)儀，王鐵山也談到了個(gè)人的使用感受?！斑@些年酶標(biāo)儀行業(yè)的發(fā)展很快，有很多新的品牌的誕生，并且在吸光酶標(biāo)儀這個(gè)領(lǐng)域做的很好，但是在多功能酶標(biāo)儀這個(gè)領(lǐng)域，還是幾個(gè)老品牌獨(dú)領(lǐng)風(fēng)騷，比如美谷生物。尤其是在多模塊的多功能酶標(biāo)儀方面，美谷生物基本上是獨(dú)占鰲頭”。

SpectraMax ^® i3x 多功能酶標(biāo)儀

中醫(yī)藥的發(fā)展重點(diǎn)在于臨床評(píng)價(jià)體系

近年來(lái)，國(guó)家對(duì)中醫(yī)藥的發(fā)展給予了更大的投入和支持。雖然不是所謂“科研口”人員，但長(zhǎng)期進(jìn)行中藥研究相關(guān)的工作，王鐵山對(duì)于中醫(yī)的發(fā)展有著自己的思考。他認(rèn)為，“對(duì)于中醫(yī)和中藥而言，當(dāng)務(wù)之急不是明確療效的機(jī)制，而是發(fā)展完善中醫(yī)的臨床評(píng)價(jià)體系。目前評(píng)價(jià)藥物有效與否的臨床實(shí)驗(yàn)的金標(biāo)準(zhǔn)是 RCT（臨床對(duì)照實(shí)驗(yàn)）體系，但中醫(yī)藥在這一方面一直做的不好。一方面，有些中藥確實(shí)比較難用現(xiàn)有的 RCT 體系完成，另一方面，實(shí)踐中經(jīng)常出現(xiàn)懂 RCT 的不懂中醫(yī)，懂中醫(yī)的不懂 RCT 的“單盲”，所以現(xiàn)在急需懂臨床設(shè)計(jì)又懂中醫(yī)的復(fù)合型人才。

比如用于新冠肺炎治療的‘三方三藥’在新冠中發(fā)揮了不可替代的作用，但是由于缺少 RCT 實(shí)驗(yàn)的證據(jù)，其全球推廣使用時(shí)受到了極大的阻礙。建立符合 RCT 的中醫(yī)的臨床評(píng)價(jià)體系，培養(yǎng)中醫(yī)臨床實(shí)驗(yàn)人才，才真正有助于中醫(yī)藥的發(fā)展和走向世界。”

同樣的問(wèn)題也存在于中醫(yī)藥的論文評(píng)價(jià)中。由于成分不明，藥效評(píng)價(jià)難以通過(guò)等問(wèn)題，中藥的新藥研發(fā)過(guò)程很難發(fā)表高影響因子的 SCI 論文。王鐵山認(rèn)為：“應(yīng)該建立適合中醫(yī)藥研究的論文評(píng)價(jià)體系，像 SCI 一樣嚴(yán)格的、但不完全依賴于西方的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，這點(diǎn)對(duì)于中醫(yī)藥更好的發(fā)展十分重要?！?

后記：王鐵山是一位 90 后科研平臺(tái)管理人員，對(duì)于儀器管理使用和中藥研究，有著極大的熱情和責(zé)任感。談到所負(fù)責(zé)的儀器，他可以滔滔不絕，甚至對(duì)于細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展、顯微成像的發(fā)展總結(jié)出了一套自己的知識(shí)體系。談到中醫(yī)藥發(fā)展，他也津津樂(lè)道，雖然一再謙虛地表示自己的觀點(diǎn)不夠?qū)I(yè)，仍能看出他對(duì)于自己所從事的行業(yè)始終在積極主動(dòng)地思考。

受訪專家簡(jiǎn)介：王鐵山，畢業(yè)于北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)系，現(xiàn)任職于北京中醫(yī)藥大學(xué)北京中醫(yī)藥研究院。負(fù)責(zé)北京中醫(yī)藥大學(xué)校級(jí)科研平臺(tái)的細(xì)胞分子生物學(xué)平臺(tái)，直接負(fù)責(zé)流式細(xì)胞儀，流式細(xì)胞分選儀，高內(nèi)涵顯微鏡，SPR 分子相互作用分析系統(tǒng)等設(shè)備。對(duì)流式和顯微鏡類設(shè)備的原理和應(yīng)用有自己的見(jiàn)解，熟悉二代測(cè)序及單細(xì)胞測(cè)序和空間轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的原理及應(yīng)用，有著較為豐富的相關(guān)實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)的經(jīng)驗(yàn)。擅長(zhǎng)十色以上流式的實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)，包括顏色搭配、組別設(shè)置、電壓補(bǔ)償調(diào)節(jié)和結(jié)果分析；擅長(zhǎng)高活性無(wú)菌流式分選如穩(wěn)定轉(zhuǎn)染株單細(xì)胞克隆篩選和基于 96 孔板的單細(xì)胞測(cè)序；擅長(zhǎng)高活性多色原代細(xì)胞分選如 10X 和 BD 單細(xì)胞測(cè)序的流式前處理；擅長(zhǎng) SPR 的分析和對(duì)相互作用分子的垂釣；擅長(zhǎng)超長(zhǎng)時(shí)程活細(xì)胞成像系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)及相關(guān)方案設(shè)計(jì)。

SpectraMax^® i3x 多功能檢測(cè)平臺(tái)

● 降低背景噪音

制冷型 PMT 可降低背景噪音，即使在發(fā)光極弱的情況下也能獲得更靈敏，更寬的動(dòng)態(tài)檢測(cè)范圍。

● 用戶可升級(jí)的應(yīng)用

可升級(jí)的應(yīng)用模塊拓展了酶標(biāo)儀（讀板機(jī)）的檢測(cè)能力，用戶可根據(jù)需要任何時(shí)間隨意升級(jí)，包括熒光偏振 FP、HTRF、AlphaScreen、蛋白質(zhì)免疫印跡、細(xì)胞成像和使用注射器的快速動(dòng)力學(xué)檢測(cè)等。

● 免染細(xì)胞分析

StainFree^? 細(xì)胞檢測(cè)方法特別適用于明場(chǎng)細(xì)胞識(shí)別，在無(wú)染色的情況下，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和融合測(cè)定，從而簡(jiǎn)化細(xì)胞計(jì)數(shù)工作流程。

● 細(xì)胞通路分析

可以在一個(gè)讀板機(jī)上完成細(xì)胞融合度和細(xì)胞活性成像、蛋白質(zhì)免疫印跡以及核酸和蛋白的定量。